1、实验室检查
(1)尿液半乳糖检查：尿糖阳性，葡萄糖氧化酶法尿糖阴性，纸层析可鉴别出其为半乳糖。
(2)新生儿筛查半乳糖血症：用Beutler法过筛缺陷酶，观察有无荧光的产生，以此作为最后评定的依据，本病无荧光产生。酶活性的缺陷也可从肝、肠黏膜、成纤维细胞及白细胞中得到反映。
(3)血半乳糖浓度测定：正常浓度为110～194μmol/L(应用半乳糖氧化酶或半乳糖脱氢酶法)，患者其血浓度升高。
(4)尿半乳糖和半乳糖醇浓度测定：可用酶法测定。
(5)红细胞1-磷酸半乳糖测定。
(6)半乳糖代谢相关酶测定：此为确诊本病的重要依据。
(7)非特异性的生化指标测定：诸如蛋白尿、葡萄糖尿等。
2、辅助检查
(1)B超：依据临床表现选做B超。
(2)通过胎儿镜采取胎血进行酶活性测定：测定羊水中半乳糖醇的含量及羊水细胞中酶的活性等。做酶基因的突变分析,可对胎儿进行产前诊断。
(3)半乳糖呼吸试验：可对13C-半乳糖转化为13CO2进行定量测定，以了解机体对半乳糖的氧化能力。